基于qiime2的扩增子数据分析
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https://www.youtube.com/watch?v=g5BdGP4V5YA
关于rarefy的解释 -
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https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.09.15.460495v2.full.pdf
Tourmaline: a containerized workflow for rapid and
iterable amplicon sequence analysis using QIIME 2
and Snakemake
使用snakemake对qiime2做了自动化 -
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对于__的问题：
qiime的图上会有__;__这种注释
经过查询：
数据里面是
k__Bacteria; p__Proteobacteria; c__Betaproteobacteria; o__Burkholderiales 这种级别不够的注释
对于级别不够的情况 qiime view 会用__补齐但是注意，s__ p__这种情况数据也是有的 如果需要过滤 可以用
qiime taxa filter-table --p-exclude "s__"过滤 -
https://www.drive5.com/usearch/manual/qiime_classic.html
OTU 表中的数字代表reads数 -
DADA2的限制
DADA2对于单体序列 无法识别 -
https://github.com/benjjneb/dada2/issues/1095
dereplication (derepFastq) required?
dada2在处理的时候 可以去重 只是为了降低内存消耗？在最后统计丰度的时候 会把重复再计算回来？ -
dyn.load("./src/dada2.so")
Error in dyn.load("./src/dada2.so") :
unable to load shared object '/home/jynlix/Downloads/src/dada2/dada2/./src/dada2.so':
/home/jynlix/Downloads/src/dada2/dada2/./src/dada2.so: undefined symbol: _ZTIN3tbb4taskE使用gdb 调试dada2时报错 dada2依赖 Rcpp 做多线程 Rcpp 依赖 tbb 需要提前把这个包加载
dyn.load("/home/jynlix/R/x86_64-pc-linux-gnu-library/4.1/RcppParallel/lib/libtbb.so.2", local = FALSE)
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https://btep.ccr.cancer.gov/docs/qiime2/index.html
Microbiome Analysis with QIIME2 教程 -
dada2的执行过程:
filterAndTrim 过滤，截取
derepFastq (可选步骤 dada内部会判断 如果没有经过去重 会自己调用这个函数)
learnErrors 这个函数也会调用dada 以 self-consist mode 模式运行
dada 核心步骤 但是 self-consist mode = FALSE -
https://forum.qiime2.org/t/difference-between-sub-sampling-and-rarefing/18219
sub-sampling and rarefing的对比:
sub-sampling可以从sample或者feature的角度 对数据进行过滤 得到的是整个数据的子集。
rarefy是对所有feature的结果进行归一化。 -
假如data2的代码保存在 /root/data2
cd /root
R CMD build dada2
会生成dada2.so -
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https://www.jandonline.org/article/S2212-2672(20)30438-X/pdf
Associations between Diet, the Gut Microbiome,
and Short-Chain Fatty Acid Production among
Older Caribbean Latino Adults
饮食和微生物多样性的研究 主要用了关联性分析 -
https://drive5.com/usearch/manual/amplification_bias.html
Abundance and amplification bias in amplicon sequencing
序列的丰度和物种的实际丰度 可能偏差比较大
